ന്യൂ ടെക്കിന്റെ പൂർണ്ണമായും ഓട്ടോമാറ്റിക് ന്യൂക്ലിക് ആസിഡ് എക്സ്ട്രാക്ഷൻ ആൻഡ് ഡിറ്റക്ഷൻ മെഷീൻ

അഞ്ച് ശക്തി:
● ന്യൂക്ലിക് ആസിഡ് വേർതിരിച്ചെടുക്കലും ശുദ്ധീകരിച്ച ഘട്ടവും ഉപയോഗിച്ച് കോൺഫിഗർ ചെയ്‌ത ഉപകരണം
● അൾട്രാസോണിക് എക്‌സ്‌ട്രാക്ഷൻ മൊഡ്യൂൾ ഉപയോഗിച്ച് കോൺഫിഗർ ചെയ്‌ത ഉപകരണം
● ഉപകരണം പൂർണ്ണമായും സ്വയമേവ കോൺഫിഗർ ചെയ്‌തു
● വേരിയബിൾ ടെമ്പറേച്ചർ ആംപ്ലിഫിക്കേഷൻ ഉപയോഗിച്ച് കോൺഫിഗർ ചെയ്‌ത ഉപകരണം
● പൂർണ്ണമായും അടച്ച റീജന്റ് കിറ്റ് ഉപയോഗിച്ച് കോൺഫിഗർ ചെയ്ത ഉപകരണം

1. ന്യൂക്ലിക് ആസിഡ് ഡിറ്റക്ഷൻ റിയാഗന്റുകൾ വേർതിരിച്ച് ശുദ്ധീകരിക്കേണ്ടതുണ്ടോ?
ന്യൂക്ലിക് ആസിഡ് കണ്ടെത്തലിന്റെ തത്വം ഇപ്രകാരമാണ്: പ്രൈമറിന്റെ പ്രവർത്തനത്തിന് കീഴിൽ, DNA/RNA ടെംപ്ലേറ്റിൽ ചെയിൻ റിയാക്ഷൻ ആംപ്ലിഫിക്കേഷൻ നടത്താൻ DNA പോളിമറേസ് ഉപയോഗിക്കുന്നു (NA യുടെ റിവേഴ്സ് ട്രാൻസ്ക്രിപ്ഷൻ ആവശ്യമാണ്), തുടർന്ന് റിലീസ് ചെയ്ത ഫ്ലൂറസെന്റ് സിഗ്നലിന്റെ അളവ് നിർണ്ണയിക്കുന്നു. സാമ്പിളിൽ രോഗകാരിയുടെ ന്യൂക്ലിക് ആസിഡ് (ഡിഎൻഎ/ആർഎൻഎ) ഉണ്ടോ എന്ന് കണ്ടെത്തണം.

1) വേർതിരിച്ചെടുക്കുകയോ ശുദ്ധീകരിക്കുകയോ ചെയ്യാത്ത സാമ്പിളുകളിൽ അന്തിമ ഫലത്തെ ബാധിക്കുന്ന നിരവധി ഘടകങ്ങൾ അടങ്ങിയിരിക്കാം: ന്യൂക്ലീസ് (ഇത് ടാർഗെറ്റ് ന്യൂക്ലിക് ആസിഡിനെ ലയിപ്പിച്ച് തെറ്റായ നെഗറ്റീവ് ഉണ്ടാക്കാം), പ്രോട്ടീസ് (ഡിഎൻഎ പോളിമറേസ് കുറയ്ക്കുകയും തെറ്റായ നെഗറ്റീവ് ഉണ്ടാക്കുകയും ചെയ്യും), ഹെവി മെറ്റൽ ഉപ്പ് (സിന്തേസിന്റെ നിഷ്ക്രിയത്വത്തിലേക്ക് നയിക്കുകയും തെറ്റായ പോസിറ്റീവ് ഉണ്ടാക്കുകയും ചെയ്യുന്നു), വളരെ അസിഡിറ്റി അല്ലെങ്കിൽ വളരെ ആൽക്കലൈൻ PH (പ്രതികരണം പരാജയപ്പെടാൻ ഇടയാക്കിയേക്കാം), അപൂർണ്ണമായ RNA (തെറ്റായ നെഗറ്റീവ് റിവേഴ്സ് ട്രാൻസ്ക്രിപ്ഷൻ പരാജയത്തിലേക്ക് നയിക്കുന്നു).

2)ചില സാമ്പിളുകൾ നേരിട്ട് വർദ്ധിപ്പിക്കാൻ ബുദ്ധിമുട്ടാണ്: ഗ്രാം പോസിറ്റീവും ചില പരാന്നഭോജികളും, അവയുടെ കട്ടിയുള്ള കോശഭിത്തികളും മറ്റ് ഘടനകളും കാരണം, ന്യൂക്ലിക് ആസിഡ് വേർതിരിച്ചെടുക്കലും ശുദ്ധീകരണ പ്രക്രിയയും നടത്തുന്നില്ലെങ്കിൽ, വേർതിരിച്ചെടുക്കൽ രഹിത കിറ്റ് പരാജയപ്പെടാം. സാമ്പിളുകൾ.

അതിനാൽ, ന്യൂക്ലിക് ആസിഡ് എക്സ്ട്രാക്ഷൻ സ്റ്റെപ്പ് ഉപയോഗിച്ച് കോൺഫിഗർ ചെയ്ത ടെസ്റ്റ് കിറ്റോ ഉപകരണമോ തിരഞ്ഞെടുക്കാൻ ശുപാർശ ചെയ്യുന്നു.

2. കെമിക്കൽ എക്സ്ട്രാക്ഷൻ അല്ലെങ്കിൽ ഫിസിക്കൽ അൾട്രാസോണിക് ഫ്രാഗ്മെന്റേഷൻ എക്സ്ട്രാക്ഷൻ?
പൊതുവായി പറഞ്ഞാൽ, മിക്ക മുൻകരുതലുകളിലും ശുദ്ധീകരണത്തിലും കെമിക്കൽ എക്സ്ട്രാക്ഷൻ പ്രയോഗിക്കാവുന്നതാണ്.എന്നിരുന്നാലും, കട്ടിയുള്ള മതിലുകളുള്ള ഗ്രാം പോസിറ്റീവ് ബാക്ടീരിയകളിലും ചില പരാന്നഭോജികളിലും, കെമിക്കൽ എക്‌സ്‌ട്രാക്‌ഷന് ഫലപ്രദമായ ന്യൂക്ലിക് ആസിഡ് ഫലകങ്ങൾ ലഭിക്കില്ല, ഇത് തെറ്റായ നെഗറ്റീവ് കണ്ടെത്തലിന് കാരണമാകുന്നു.കൂടാതെ, കെമിക്കൽ എക്സ്ട്രാക്ഷൻ പലപ്പോഴും ശക്തമായ ഏജന്റുകൾ ഉപയോഗിക്കുന്നു, എല്യൂഷൻ സമഗ്രമല്ലെങ്കിൽ, പ്രതികരണ സംവിധാനത്തിലേക്ക് ശക്തമായ ആൽക്കലി അവതരിപ്പിക്കുന്നത് എളുപ്പമാണ്, ഇത് കൃത്യമല്ലാത്ത ഫലങ്ങളിലേക്ക് നയിക്കുന്നു.

അൾട്രാസോണിക് ഫ്രാഗ്മെന്റേഷൻ ഫിസിക്കൽ ക്രഷിംഗ് ഉപയോഗിക്കുന്നു, ഇത് മനുഷ്യ ഉപയോഗത്തിനായി POCT മേഖലയിലെ പ്രമുഖ സംരംഭമായ GeneXpert വിജയകരമായി ഉപയോഗിച്ചു, കൂടാതെ ചില സങ്കീർണ്ണ സാമ്പിളുകളുടെ (മൈക്കോബാക്ടീരിയം ട്യൂബർകുലോസിസ് പോലുള്ളവ) ന്യൂക്ലിക് ആസിഡ് വേർതിരിച്ചെടുക്കുന്നതിൽ ഒരു സമ്പൂർണ്ണ നേട്ടമുണ്ട്.

അതിനാൽ, ന്യൂക്ലിക് ആസിഡ് എക്സ്ട്രാക്ഷൻ സ്റ്റെപ്പ് ഉപയോഗിച്ച് കോൺഫിഗർ ചെയ്ത ഒരു ടെസ്റ്റ് കിറ്റോ ഉപകരണമോ തിരഞ്ഞെടുക്കാൻ ശുപാർശ ചെയ്യുന്നു.ഒരു അൾട്രാസോണിക് എക്സ്ട്രാക്ഷൻ മൊഡ്യൂൾ ഉണ്ടെങ്കിൽ അത് അനുയോജ്യമാണ്.

3. മാനുവൽ, സെമി ഓട്ടോമാറ്റിക്, ഫുൾ ഓട്ടോമാറ്റിക്?
ഇത് തൊഴിൽ ചെലവിന്റെയും തൊഴിൽ കാര്യക്ഷമതയുടെയും പ്രശ്നമാണ്.നിലവിൽ, മതിയായ സ്റ്റാഫുകളില്ലാത്ത വളർത്തുമൃഗ ആശുപത്രികൾ, ന്യൂക്ലിക് ആസിഡ് വേർതിരിച്ചെടുക്കലും കണ്ടെത്തലും ചില കഴിവുകളും അനുഭവപരിചയവും ആവശ്യമുള്ള ഒരു ജോലിയാണ്.പൂർണ്ണമായും ഓട്ടോമാറ്റിക് ന്യൂക്ലിക് ആസിഡ് എക്സ്ട്രാക്ഷൻ ആൻഡ് ഡിറ്റക്ഷൻ മെഷീൻ മികച്ച ചോയിസ് ആണെന്നതിൽ സംശയമില്ല.

4. സ്ഥിരമായ താപനില ആംപ്ലിഫിക്കേഷൻ അല്ലെങ്കിൽ വേരിയബിൾ താപനില ആംപ്ലിഫിക്കേഷൻ?
ആംപ്ലിഫിക്കേഷൻ പ്രതികരണം ഒരു ന്യൂക്ലിക് ആസിഡ് കണ്ടെത്തൽ ലിങ്കാണ്, ഈ ലിങ്കിൽ ഉൾപ്പെട്ടിരിക്കുന്ന പ്രൊഫഷണൽ സാങ്കേതികവിദ്യ സങ്കീർണ്ണമാണ്.ഏകദേശം പറഞ്ഞാൽ, ന്യൂക്ലിക് ആസിഡിനെ വർദ്ധിപ്പിക്കാൻ എൻസൈമുകൾ ഉപയോഗിക്കുന്നു.ആംപ്ലിഫിക്കേഷൻ പ്രക്രിയയിൽ, ആംപ്ലിഫൈഡ് ഫ്ലൂറസെൻസ് സിഗ്നൽ അല്ലെങ്കിൽ എംബഡഡ് ഫ്ലൂറസെൻസ് സിഗ്നൽ കണ്ടുപിടിക്കുന്നു.പൊതുവായി പറഞ്ഞാൽ, ഫ്ലൂറസെൻസ് സിഗ്നൽ എത്ര നേരത്തെ പ്രത്യക്ഷപ്പെടുന്നുവോ, സാമ്പിളിന്റെ ടാർഗെറ്റ് ജീൻ ഉള്ളടക്കം വർദ്ധിക്കും.

സ്ഥിരമായ താപനില വർദ്ധനവ് ഒരു നിശ്ചിത ഊഷ്മാവിൽ ന്യൂക്ലിക് ആസിഡ് ആംപ്ലിഫിക്കേഷനാണ്, അതേസമയം വേരിയബിൾ ടെമ്പറേച്ചർ ആംപ്ലിഫിക്കേഷൻ ഡീനാറ്ററേഷൻ-അനിയലിംഗ്-എക്സ്റ്റെൻഷൻ അനുസരിച്ച് ഒരു ചാക്രിക ആംപ്ലിഫിക്കേഷനാണ്.സ്ഥിരമായ താപനില ആംപ്ലിഫിക്കേഷൻ സമയം നിർവ്വഹിച്ചിരിക്കുന്നു, അതേസമയം ഉപകരണത്തിന്റെ താപനില വർദ്ധനയുടെയും തകർച്ചയുടെയും നിരക്ക് വേരിയബിൾ ടെമ്പറേച്ചർ ആംപ്ലിഫിക്കേഷൻ സമയത്തെ വളരെയധികം ബാധിക്കുന്നു (ഇപ്പോൾ, പല നിർമ്മാതാക്കൾക്കും ഏകദേശം 30 മിനിറ്റിനുള്ളിൽ 40 സൈക്കിൾ ആംപ്ലിഫിക്കേഷൻ ചെയ്യാൻ കഴിഞ്ഞിട്ടുണ്ട്).

ലബോറട്ടറി സാഹചര്യങ്ങൾ നല്ലതും സോണിംഗ് കർശനമാണെങ്കിൽ, രണ്ടും തമ്മിലുള്ള കൃത്യത വ്യത്യാസം വലുതായിരിക്കില്ല എന്ന് ന്യായമായും പറയാൻ കഴിയും.എന്നിരുന്നാലും, വേരിയബിൾ ടെമ്പറേച്ചർ ആംപ്ലിഫിക്കേഷൻ താരതമ്യേന കുറഞ്ഞ സമയത്തിനുള്ളിൽ കൂടുതൽ ന്യൂക്ലിക് ആസിഡ് ഉൽപ്പന്നങ്ങളെ സമന്വയിപ്പിക്കും.കർശനമായ സോണിംഗും പ്രൊഫഷണൽ പരിശീലന ഉദ്യോഗസ്ഥരും ഇല്ലാത്ത ലബോറട്ടറികളിൽ, ന്യൂക്ലിക് ആസിഡ് എയറോസോൾ ചോർച്ചയുടെ അപകടസാധ്യത കൂടുതലായിരിക്കും, ചോർച്ച സംഭവിച്ചാൽ തെറ്റായ പോസിറ്റീവ് സംഭവിക്കുന്നു, ഇത് ഇല്ലാതാക്കാൻ വളരെ ബുദ്ധിമുട്ടാണ്.

കൂടാതെ, സാമ്പിൾ സങ്കീർണ്ണമാകുമ്പോൾ സ്ഥിരമായ താപനില ആംപ്ലിഫിക്കേഷനും നോൺ-സ്പെസിഫിക് ആംപ്ലിഫിക്കേഷനുള്ള സാധ്യത കൂടുതലാണ് (ആപേക്ഷിക പ്രതികരണ താപനില കുറവാണ്, കൂടാതെ എക്സ്റ്റൻഷൻ താപനില കൂടുതലാണ്, പ്രൈമർ ബൈൻഡിംഗ് സ്പെസിഫിസിറ്റി മികച്ചതാണ്).

നിലവിലെ സാങ്കേതികവിദ്യയെ സംബന്ധിച്ചിടത്തോളം, വേരിയബിൾ ടെമ്പറേച്ചർ ആംപ്ലിഫിക്കേഷൻ കൂടുതൽ വിശ്വസനീയമാണ്.

5. ന്യൂക്ലിക് ആസിഡ് ആംപ്ലിഫിക്കേഷൻ ഉൽപ്പന്നങ്ങളുടെ ചോർച്ച എങ്ങനെ ഒഴിവാക്കാം?
നിലവിൽ, പല നിർമ്മാതാക്കളും ഗ്രന്ഥി തരം പിസിആർ ട്യൂബ് ന്യൂക്ലിക് ആസിഡ് റിയാക്ഷൻ ട്യൂബായി തിരഞ്ഞെടുക്കുന്നു, ഇത് ഘർഷണത്താൽ അടച്ചിരിക്കുന്നു, കൂടാതെ വേരിയബിൾ താപനില പിസിആർ ആംപ്ലിഫിക്കേഷനിലെ വേരിയബിൾ ടെമ്പറേച്ചർ ഡിനാറ്ററേഷനിലെ താപനില ഡീനാറ്ററേഷൻ 90 ഡിഗ്രിയിൽ എത്തുന്നു.
സെന്റിഗ്രേഡ്.ചൂടോടെയുള്ള ആവർത്തിച്ചുള്ള വികാസവും തണുപ്പിനൊപ്പം സങ്കോചവും പിസിആർ ട്യൂബിന്റെ സീലിംഗിന് വലിയ വെല്ലുവിളിയാണ്, കൂടാതെ ഗ്രന്ഥി തരം പിസിആർ ട്യൂബ് ചോർച്ചയ്ക്ക് കാരണമാകുന്നത് താരതമ്യേന എളുപ്പമാണ്.

പ്രതികരണ ഉൽപ്പന്നത്തിന്റെ ചോർച്ച ഒഴിവാക്കാൻ പൂർണ്ണമായും സീൽ ചെയ്ത കിറ്റ്/ട്യൂബ് ഉപയോഗിച്ച് പ്രതികരണം സ്വീകരിക്കുന്നതാണ് നല്ലത്.ന്യൂക്ലിക് ആസിഡ് വേർതിരിച്ചെടുക്കുന്നതിനും കണ്ടെത്തുന്നതിനുമായി പൂർണ്ണമായി മുദ്രയിട്ടിരിക്കുന്ന ഒരു കിറ്റ് വർക്ക് ഔട്ട് ചെയ്യാൻ കഴിയുമെങ്കിൽ അത് തികഞ്ഞതായിരിക്കും.

അതിനാൽ ന്യൂ ടെക്കിന്റെ പുതിയ പൂർണ്ണ ഓട്ടോമാറ്റിക് ന്യൂക്ലിക് ആസിഡ് എക്സ്ട്രാക്ഷൻ ആൻഡ് ഡിറ്റക്ഷൻ മെഷീന് മുകളിൽ പറഞ്ഞ അഞ്ച് ഒപ്റ്റിമൽ ചോയിസുകൾ ഉണ്ട്.